动物的再生能力一直是一个令人着迷且非常复杂的生物学过程。许多动物的再生能力特别是高等动物受到极大的限制，然而，有趣的是，在自然界中一些动物依然保留强大的再生能力，例如某些脊椎动物（斑马鱼、蝾螈、壁虎等）可以治愈创伤、再生丢失的器官或者附肢（例如：心脏、尾巴、晶状体）；某些无脊椎动物（例如：涡虫）甚至拥有更强的再生能力，可以从少量组织和细胞再生整个生命体，因此被广泛用于干细胞生物学和再生医学研究。另一类无脊椎动物——蚯蚓，不仅是土壤生态系统中的重要成员，而且具备比涡虫更为复杂的表型结构（例如：中枢神经系统大脑初步具备记忆雏形）。更重要的是，它拥有极强的前/后部体节再生能力。达尔文在《腐殖土的形成和蚯蚓的作用》一书中写到：“我们很难找到其他的生灵像它们一样，虽看似卑微，却在世界历史的进程中起到了如此重要的作用”。然而到目前为止，蚯蚓再生的分子细胞学机制还不是很清楚。

　　中国科学院昆明动物研究所吴东东课题组利用长读段PacBio平台+Hi-C辅助组装等策略，测序并拼装了准染色体水平的高质量安德爱胜蚓（Eisenia andrei）基因组（Scaffold N50≈111Mb），并通过不同再生时期bulk转录组和单细胞转录组整合揭示蚯蚓再生的分子细胞学机制。研究发现蚯蚓基因组中重复序列LINE2转座元件可能在蚯蚓再生中扮演重要调控角色，例如LINE2元件显著高比例地插入到蚯蚓早期再生相关的差异基因locus中；同时某些差异表达的LINE2元件（位于蛋白编码基因侧翼5Kb区域）和它们的邻近基因拥有极为相似的表达模式。在高度再生物种（例如：涡虫）的再生过程中，EGR1是一个核心调控者，而在该研究中，发现EGR1不仅在蚯蚓再生过程中发生差异高表达，而且其侧翼的LINE2元件也发生显著差异表达上调，因此，推测这些显著差异表达的LINE2元件可能通过调控邻近基因的表达来参与蚯蚓再生过程。另一方面，在蚯蚓基因组中发现大量基因复制事件（例如：大量潜在扩张的基因家族），这些扩张的基因家族主要富集在发育生物学通路，而发育和再生在某些通路可能往往是共通的。进一步发现某些显著扩张的基因家族，例如EGFR（epidermal growth factor receptor），可能通过增加其拷贝数剂量效应来调控蚯蚓再生过程（注：12个EGFR家族成员的8个成员在蚯蚓再生早期发生显著差异表达）。在转录激活水平，发现一些应激早期基因在蚯蚓和涡虫早期再生中共同激活，暗示蚯蚓和涡虫在早期再生应激反应中可能具有共享的作用机制，进一步发现4个与早期再生显著相关的共表达网络模块和系列hub转录调控因子，富集分析显示它们可能参与再生早期细胞的增殖和分化。同时，蚯蚓再生早期的单细胞转录组解析暗示蚯蚓再生早期72h后损伤愈合部位细胞的高比例组分是干细胞，暗示多能干细胞在蚯蚓再生早期过程中具有重要作用。该研究提供了一些蚯蚓再生的候选分子细胞学机制，提出蚯蚓能够作为研究再生生物学或者再生医学的一个新模型。

　　该研究以Genome and single-cell RNA-sequencing of the earthworm Eisenia andrei identifies cellular mechanisms underlying regeneration为题，于5月27日在《自然-通讯》（Nature Communications）上在线发表。昆明动物所助理研究员邵永、中国农业科学院（深圳）农业基因组所博士王晓波、昆明动物所博士生张锦锦和李明莉为文章的共同第一作者，昆明动物所研究员吴东东、中国农业科学院（深圳）农业基因组所研究员阮珏、昆明动物所研究员张国捷为文章的共同通讯作者。该研究得到国家自然科学基金委、中科院战略性先导科技专项、中国西南野生生物种质资源库动物分库等的支持。

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图2：单细胞RNA-sequencing揭示再生的细胞机制。