正文:猪人工授精技术是指采用人工的方法用器械将公猪的精液采出,经过检查、处理和保存,再用器械将精液输入到发情母猪的生殖道内以替代本交的一种配种方法。是现代畜牧业生产中广泛应用的一项先进技术。俗话说:“母猪好,好一窝;公猪好,好一坡”,规模化猪场采用人工受精技术,公母猪比例可由1:30提高到1:300;社会化供精,每头公猪每年至少可配1000头以上的母猪,极大地提高了养猪的经济效益。猪的人工受精技术操作过程主要包括:公猪的调教、采精、精液稀释、保存运输、母猪发情鉴定、输精等几个步骤。
1采精1.1公猪调教1.1.1调教年龄:后备公猪7~8月龄可开始调教,有配种经验的公猪也可进行采精调教。
1.1.2调教方法:将成年公猪的精液或发情母猪尿液涂在假台猪后部,将公猪引至假台猪训练其爬跨,每天可调教1次.但每次调教时间最好不超过15分钟。
1.2采精方法1.2.1采精前准备:①采精公猪的准备。剪去公猪包皮上的长毛.将公猪体表脏物冲洗干净并擦干体表水渍。②采精器件的准备。集精器置于38℃的恒温箱中备用。当公猪引至采精室后.迅速取出集精器,另外应准备好清洁公猪包皮污物的干纱布等。③配置精液稀释液。配置好所需量的稀释液,置于水浴锅中预热至35℃。④精液质检设备的准备。调节好质检用的显微镜.开启显微镜载物台上恒温板以及预热精子密度测定仪。⑤精液分装器件的准备。准备好精液分装器、精液瓶或袋等。
1.2.2采精程序:采精员一手带双层手套,另一手持37℃保温杯(内装1次性食品袋)用于收集精液,用O.1%高锰酸钾溶液清洗其腹部和包皮.再用温水清洗干净,避免残留药物对精子的伤害。采精员挤出公猪包皮积尿,按摩公猪包皮。刺激其爬跨假台猪,待公猪爬跨假台猪并伸出阴茎时,脱去外层手套,用手(大拇指与龟头相反方向)紧握公猪龟头,顺其向前冲力将阴茎拉直,握紧阴茎龟头防止其旋转,注意在采精过程中不要碰阴茎体,否则阴茎将迅速缩回。待公猪射精时用四层纱布过滤收集精液于保温杯内的一次性食品袋内。最初射出的少量(5ml左右)精液不接取,直到公猪射精完毕,一般射精过程历时5~7分钟。集精杯位置应高于包皮部,可防止包皮部液体流入集精杯内。
1.3采精频率采精频率以单位时间内获得最多的有效精子数来决定,做到定时、定点、定人。成年公猪每周采精不超过2次,青年公猪每周1次。
2精液品质检查2.1采精量采集精液后称重,按每克1ml计,避免用量筒等测量精液体积。精液量100ml以下为不合格,废弃;100ml以上合格;150ml以上为良;250ml以上为优。
2.2颜色正常的精液是乳白色或浅灰色,精子密度越高,色泽愈浓,其透明度愈低。如带有绿色、黄色、浅红色、红褐色等异常颜色的精液应废弃。
2.3气味猪精液略带腥味,如有异常气味,应废弃。
2.4 PH值(酸碱度)正常范围7.0~7.8。
2.5 精子活力检查精子活力是指呈直线运动的精子所占百分率.在显微镜下观察,一般按0.1~1.O的十级评分法估计,鲜精活力要求不低于0.7.检查活力时要求载玻片和盖玻片都应进行37℃预热。
2.6精子密度指每毫升精液中所含的精子数,是确定稀释倍数的重要标准,要求用血细胞计数板计数或精液密度仪测定。血细胞计数方法:①以微量加样器取具有代表性原精液200微升,用3%NaCl稀释10倍;②取1滴稀释后精液置于血细胞计数板的槽中,靠虹吸将精液吸入计数室内;③在高倍镜下计数5个中方格内的精子总数.将该数乘以50万,即得原精液每毫升的精子数(即精液密度)。
2.7精子畸形率畸形率是指异常精子的百分率.一般要求畸形率不超过18%,其测定可用普通显微镜,但需伊红或姬姆萨染色;而相差显微镜可直接观察活精子的畸形率,公猪使用过频或高温环境会出现精子尾部带有原生质滴的畸形精子。畸形精子种类很多,如:巨型精子、短小精子、双头或双尾精子,顶体膨胀或脱落、精子头部残缺或尾部分离、尾部变曲。要求每头公猪每两周检查1次精子畸形率。
3精液稀释、分装、贮存3.1精液稀释液的制备几种常见精液稀释液的配置
配方1 鲜奶稀释液:将新鲜牛奶通过3~4层纱布过滤,装在三角烧瓶或烧杯,放在水锅里,煮沸消毒10~15分钟后取出,冷却后,除去浮在上面的乳皮,重复两次即可使用。用玻璃棒除去乳皮后,奶中可能还有小的脂滴,可以用消毒过的纱布沾去,否则会影响精子的正常运动和受精力。
配方2 BTS稀释液:葡萄糖37.15克,柠檬酸钠6克,乙二胺1.25克,碳酸氢钠1.25克,氯化钾0.75克,青霉素钠0.6克,硫酸链霉素 1克,蒸馏水1000毫升。保存3天。
配方3 Modena(摩德娜)溶液:取葡萄糖(右旋糖)27.5克,柠檬酸钠6.9克,碳酸氢钠1克,乙二胺四乙酸钠2.35克,柠檬酸2.9克,二羟甲基氨基甲烷5.65克,硫酸多粘霉素0.0169克,硫酸庆大霉素0.15克,用蒸馏水配到1000毫升。
3.2精液的稀释:稀释的倍数主要根据精液中精子的密度而定,一般为2~3倍。通过稀释后每毫升应含精子数不低于0.4亿。稀释精液时应测量原精液的温度,根据精液温度调整稀释液的温度,两者温度差不超过2℃,可以把所采的精液和稀释液同放于35℃的恒温水浴锅中。然后慢慢将稀释液沿瓶壁倒入精液中,轻轻地摇均匀。
3.3精液分装:稀释后的精液经检查活力合格,可进行分装。用消毒过的漏斗把稀释后的精液分装于塑料贮精瓶或贮精袋内,每瓶(袋)装80~100毫升,有效精子数30亿以上。装完后若贮精瓶不十分满,应用手捏瘪瓶子排出空气,旋紧瓶盖,贮精袋应用加热封口,贴上标签,标明公猪号、采精时间、精液数量等。分发使用或贮藏销售。
3.4精液的存储:精液置于室温(25℃)1~2小时后,放入17℃恒温箱贮存,也可将精液用毛巾包严直接放入17℃恒温箱内。每隔12小时轻轻摇动一次,防止精子沉淀而死亡。短效稀释液可保存3天,中小可保存4~6天,长效可保存7~9天。
4输精4.1输精的时间发情母猪出现“静立反应”后8~12小时,肌注20IU催产素,3~5分钟后进行第一次输精,之后每隔8~12小时再进行第二次和第三次输精。
4.2精液检查从17℃恒温箱中取出精液,轻轻摇匀。用已灭菌的滴管取1滴放于预热的载玻片上,置于37℃的恒温箱中片刻,用显微镜检查活力,精液活力≥0.7方可使用。
4.3输精管用灭菌后的输精管进行输精。
4.4输精程序4.4.1输精人员清洁消毒双手。
4.4.2清洁母猪外阴、尾根及臀部周围,再用温水浸湿毛巾擦干外阴部。
4.4.3从密封袋中取出灭菌后的输精管,手不应接触输精管前2/3部分,在其前端涂上润滑液。
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